人外周血造血干細胞分離液
1. 適用于各種動物血液及骨髓本系列產(chǎn)品檢索
2. 相關(guān)試劑及耗材
3. 注意事項
4. 應(yīng)用
5. 產(chǎn)品性能指標
6. 貯藏及保存期限
7. 實驗前準備
8. 各種動物血液及骨髓干細胞分離液使用方法說明及圖例
9. HES-TBD550 使用說明
貨號 品牌 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 報價
| WBC1085Z | TBD | 豚鼠腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1090C | TBD | 雞外周血白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1090CP | TBD | 雞臟器組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1078H | TBD | 猴外周血白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1078HP | TBD | 猴臟器組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1078HZ | TBD | 猴腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1110 | TBD | 豬外周血白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1110P | TBD | 豬臟器組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1110C | TBD | 豬腸黏膜組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1110Z | TBD | 豬腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1094 | TBD | 馬外周血白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1094P | TBD | 馬臟器組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1094Z | TBD | 馬腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1087 | TBD | 羊外周血白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1087P | TBD | 羊臟器組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1087Z | TBD | 羊腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1080F | TBD | 魚全血白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
| WBC1080FZ | TBD | 魚組織白細胞分離液試劑盒 | 100ml | 600 |
1. 適用于各種動物血液 適用于各種動物血液 于各種動物血液及骨髓本系列產(chǎn)品檢索：：：：
A． 本分離液是敏光型的，在運輸和貯藏過程中應(yīng)在 18℃-25℃避光保存，啟封后置 4
℃保存避免微生物污染。另外，本品為真空包裝，未啟封前置于 10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶，
影響分離效果。
B． 待分離的樣本要求新鮮，避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一定在 20℃水浴
箱中復(fù)溫 20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在 20℃±2℃時分離效果，且所有操作
過程一定要在無菌條件下進行。
C． 由于各品牌離心機的性能不同，國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異，可能影響
分離效果，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)，調(diào)節(jié)離心的時間，摸索*的分離條件（具體分離條件
各實驗室自定）。
D． 使用無靜電反應(yīng)的離心管，推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。
E． *抗凝劑選擇：EDTA、枸櫞酸、肝素。應(yīng)注意在血液稀釋過程中應(yīng)去除抗凝劑
體積。
F． 分離過程中所用其他試劑如：羥乙已基淀粉 550、全血及組織稀釋液、細胞洗滌液及
紅細胞裂解液等以我公司產(chǎn)品為*選擇，本公司相關(guān)系列產(chǎn)品無菌、無病毒、無支原體、
低內(nèi)毒素水平且無細胞毒性，所獲得的細胞可保持完好的生物活性和完整的細胞形態(tài)。
4. .. 應(yīng) 4. 用
適用于從動物血液或骨髓中分離干細胞。
5.. . . 產(chǎn)品性能指標
pH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
內(nèi)毒素 ≤0.5...EU/ml
無菌 直接接種培養(yǎng) 14 天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物 每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 20 粒以下含 25μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 5 粒以下
6.. . . 貯藏及保存期限 貯藏及保存期限
18℃-25℃避光保存，有效期兩年。啟封后置 4℃保存，有效期一周。
注：：：：若保證無微生物污染，啟封后可置 4℃長期保存。但應(yīng)注意保存溫度較低時本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
7. .. 實驗前準備 7. 實驗前準備
A． 試劑
干細胞分離液、全血及組織稀釋液、細胞洗滌液、羥乙已基淀粉 550、胎牛血清
B． 器材
玻璃離心管、玻璃滴管
水平轉(zhuǎn)子離心機、無菌工作臺
8.. . . 使用方法說明及圖例 使用方法說明
A.
Ⅰ. 取新鮮抗凝血液或臍帶血與羥乙已基淀粉 550（Cat#aaa：：：：HES----TBD550）按 1:1 比例混合，
37℃反應(yīng) 5-10 分鐘（5ml 以下樣本反應(yīng) 5 分鐘，5ml 以上樣本反應(yīng) 10 分鐘）；
Ⅱ. 取新鮮抗凝骨髓，加入一份細胞洗滌液（Cat#：2010X1118），混勻后以 400g（約
1500 轉(zhuǎn)/分）離心 5 分鐘，棄去上清。沉淀與羥乙已基淀粉 550（Cat#aaa：：：：HES----TBD550）
按 1:1 比例混合，37℃反應(yīng) 5-10 分鐘（5ml 以下樣本反應(yīng) 5 分鐘，5ml 以上樣本反
應(yīng) 10 分鐘）；
B. 加入為步驟 A 中所得混合液 1/2 體積的全血及組織稀釋液（Cat#：2010C1119）混勻 20
℃-30℃自然沉降 20-30 分鐘，吸取上清備用；
C. 向步驟 B 中所得上清液中加入為其一倍以上體積的細胞洗滌液（Cat#：2010X1118）混
勻，以 500g（約 1800 轉(zhuǎn)/分）離心 15 分鐘（半徑 15cm 水平轉(zhuǎn)子），棄去上清保留沉淀
細胞；
D. 向細胞沉淀中加入全血及組織稀釋液（Cat#：2010C1119）調(diào)整細胞濃度為 2×108—1×
109個/ml，小心疊加于細胞分離液之液面上（混合液：分離液=2:1）；
E. 以 400g（約 1500 轉(zhuǎn)/分）離心 20 分鐘（半徑 15cm 水平轉(zhuǎn)子）；
此時，離心管中由上至下分為四層：*層；為稀釋液層。第二層；為環(huán)狀乳白色含所
需干細胞層。第三層；為透明分離液層。第四層；為極少數(shù)紅細胞層。收集第二層細胞放入
約為其 5-10 倍體積的細胞洗滌液（Cat#：2010X1118）中，充分混勻后以 500g（約 1800 轉(zhuǎn)
/分）離心 15 分鐘。沉淀經(jīng)反復(fù)洗滌 2 次既得所需干細胞。
F. 為獲得純度更高的干細胞，在步驟 E 中離心完成后可吸取第二層干細胞層再與羥乙已基淀粉 550（Cat#aaa：：：：HES----TBD550）按 1:1 比例混勻，20℃-30℃自然沉降 20-30 分鐘，收集上清。只能用于科學研究，不能用于臨床檢測
血小板 100-300×109/L（10 萬-30 萬個/mm3)
名稱 占白細胞總數(shù)百分比
嗜中性粒細胞 30%-70%
嗜酸性粒細胞 0.5%-5%
嗜堿性粒細胞 0%-1%
淋巴細胞 20%-40%
白細胞分類計數(shù)
單核細胞 3%-8%
干細胞 約占外周血細胞數(shù)量3%
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